Описание:
SPDP-dPEG12-NHS эфир — это высокочистый гетеробифункциональный сшивающий агент, содержащий N-гидроксисукцинимидный (NHS) эфир и пиридиндисульфидную (SPDP) группу, разделённые длинным гидрофильным полиэтиленгликолевым спейсером dPEG12 (12 этиленгликолевых единиц). Продукт разработан НПО ЭкоТек для биоконъюгации и направленного связывания биомолекул. NHS-эфирная группа обеспечивает ацилирование первичных аминов в белках, пептидах или антителах с образованием стабильных амидных связей, в то время как SPDP-группа позволяет проводить контролируемое восстановительное расщепление дисульфидной связи для присоединения тиоловых групп. dPEG-спейсер длиной 12 звеньев повышает растворимость в водной среде и снижает стерические затруднения при конъюгации. Вещество представляет собой твёрдый порошок белого или кремового цвета, растворимый в полярных органических растворителях (ДМСО, ДМФА, ацетонитрил) и частично растворимый в воде. Хранить при -20°C в защищённом от света месте.
Применение:
SPDP-dPEG12-NHS эфир применяется для конъюгации антител, белков, пептидов и других биомолекул через амино- и тиольные группы. В НПО ЭкоТек используется для разработки иммуноконъюгатов для терапии рака, наночастиц с направленной доставкой лекарств и биосенсоров. Особенности: 1) Длинный гидрофильный спейсер dPEG12 улучшает биосовместимость и снижает неспецифическое связывание. 2) Разъединяемая дисульфидная связь позволяет контролировать высвобождение активного вещества в клетке. 3) Высокая селективность реакции с аминогруппами при pH 7-9. Протокол: Растворить реагент в безводном ДМСО (концентрация ~10 мМ), добавить к раствору белка (0.1-1.0 мг/мл в буфере без аминов), инкубировать 30-60 мин при 4°C. Очистить методом гель-фильтрации. Полученный модифицированный белок с пиридиндисульфидной группой реагирует с тиолами (например, восстановленные антитела, пептиды с цистеином).