ПТАД-азид

Описание:

ПТАД-азид (4-(4-(2-азидоэтокси)фенил)-1,2,4-триазолидин-3,5-дион) — производное 1,2,4-триазолидин-3,5-диона. Его можно синтезировать из этилгидразинкарбоксилата. Этот реагент представляет собой селективный сшивающий агент, способный реагировать с тирозином одной своей частью и предоставлять азидную группу — другой. После биоконъюгации с тирозином азид может взаимодействовать с алкином в реакции катализируемого медью(I) азид-алкинового циклоприсоединения (CuAAC) или с циклооктином в бесмедной реакции. Показано, что реагент селективно вводит цепи полиэтиленгликоля (ПЭГ) в белки с поверхностно экспонированными остатками тирозина. ПТАД-азид также используется при формировании антитело-лекарственных конъюгатов. Реагент совместим с различными буферными системами: фосфатно-солевым буфером (PBS), трис-HCl и их смесью (предпочтительно). Образующаяся связь с тирозином стабильна к экстремальным значениям pH, температуры и в плазме крови. Физические свойства: обычно представляет собой твёрдое вещество от белого до светло-жёлтого цвета, чувствительное к свету и влаге. Рекомендуется хранить в сухом прохладном месте. Интересный факт: ПТАД-азид применяется в передовых методах биоконъюгации, таких как электрохимическое тирозин-клик (e-Y-CLICK) присоединение, обеспечивая высокую селективность.

Применение:

ПТАД-азид — селективный сшивающий реагент для биомолекул. Один конец молекулы специфично реагирует с тирозином в белках, а другой содержит азидную группу для последующих реакций «клик-химии». После конъюгации с тирозином азидная группа может участвовать в CuAAC-реакции (с катализатором Cu(I)) или в бесмедном присоединении к циклооктину. Основные применения: 1) Сайт-специфичное введение полиэтиленгликоля (ПЭГирование) на тирозиновые остатки белков для улучшения фармакокинетики; 2) Создание антитело-лекарственных конъюгатов (ADC) для таргетной доставки препаратов; 3) Электрохимическое мечение пептидов и белков методом e-Y-CLICK. Процедура активации: перед использованием реагент необходимо активировать смешиванием в молярном соотношении 1:0.98 с 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоином (доступен в НПО ЭкоТек). Активация сопровождается изменением цвета раствора с бесцветного на тёмно-красный. Активированную форму следует использовать немедленно. Модификация белков: к раствору белка в трис- или фосфатном буфере (pH 6-9) добавляют активированный ПТАД-азид (10-кратный молярный избыток) и инкубируют при комнатной температуре до 30 мин. Избыток реагента удаляют гель-фильтрацией. Реагент совместим с PBS, Tris и смешанными буферами.