Сульфосукцинимидил 4-(N-малеимидофенил)бутират (Sulfo-SMPB)

Описание:

Sulfo-SMPB — гетеробифункциональный сшивающий агент, растворимый в воде. Содержит N-гидроксисукцинимидильный (NHS) эфир и малеимидную группу, что позволяет осуществлять ковалентное конъюгирование молекул с амино- и сульфгидрильными группами. NHS-эфиры реагируют с первичными аминами при pH 7-9 с образованием амидных связей, а малеимиды образуют стабильные тиоэфирные связи с сульфгидрильными группами при pH 6.5-7.5. В водных растворах гидролитическая деградация NHS-эфира конкурирует с основной реакцией, причём скорость гидролиза увеличивается с ростом pH. Малеимидная группа более стабильна, но также медленно гидролизуется и теряет специфичность к сульфгидрильным группам при pH > 7.5. Поэтому конъюгацию рекомендуется проводить при pH 7.2-7.5, причём реакцию с аминами (через NHS-эфир) следует выполнять до или одновременно с реакцией с тиолами (через малеимид). Применяется в биохимии для создания конъюгатов антител, пептидов, белков с флуоресцентными метками или носителями. Физически представляет собой белый кристаллический порошок, чувствительный к влаге. Растворяется в воде и полярных органических растворителях. Хранить при -20°C в сухом месте.

Применение:

Sulfo-SMPB применяется в иммунохимии, молекулярной биологии и диагностике для создания стабильных конъюгатов между биомолекулами. Основные области использования: 1) Связывание антител с ферментами или флуорофорами при создании иммуноферментных (ELISA) и иммунофлуоресцентных тест-систем; 2) Иммобилизация белков на золотых наночастицах или углеродных материалах для биосенсоров; 3) Конъюгация пептидов с носителями для вакцин; 4) Модификация поверхностей для клеточной адгезии. Рекомендуемый протокол: растворяют в буфере (напр. PBS, pH 7.2) непосредственно перед использованием. Сначала активируют аминосодержащий компонент (например, антитело), затем добавляют тиолсодержащую молекулу (например, HRP-фермент). Очистка конъюгата осуществляется гель-фильтрацией. При работе избегать восстановителей (DTT, β-меркаптоэтанол) и аминов (Tris-буфер). Продукты НПО ЭкоТек обеспечивают высокую чистоту и воспроизводимость реакций.