Описание:
Дитиотреитол (DTT) — это превосходный реагент для поддержания тиоловых (SH) групп в восстановленном состоянии в белках. Он инициирует реакцию тиол-дисульфидного обмена для полного восстановления внутримолекулярных или межмолекулярных дисульфидных связей в биомолекулах. DTT специфически воздействует на дисульфидный мостик кросс-линкера N,N′-бис(акрилоил)цистамина, разрушая матрицу полиакриламидного геля и геля для электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). Благодаря этому он высокоэффективен в буферах, которые количественно восстанавливают дисульфиды. DTT менее едкий и менее токсичный по природе, чем 2-меркаптоэтанол. Он также в 7 раз более концентрированный, чем бета-меркаптоэтанол. DTT имеет широкое применение в молекулярной биологии, включая электрофорез белков и гибридизацию mRNA.
Применение:
Превосходный реагент для поддержания тиоловых (SH) групп в восстановленном состоянии; количественно восстанавливает дисульфиды. DTT эффективен в буферах, используемых для восстановления дисульфидных связей белков перед SDS-PAGE. DTT может также использоваться для разрушения дисульфидного мостика кросс-линкера N,N′-бис(акрилоил)цистамина для разрушения матрицы полиакриламидного геля. DTT менее едкий и менее токсичен, чем 2-меркаптоэтанол. Обычно требуется семикратно меньшая концентрация DTT (100 мМ), чем 2-меркаптоэтанола (5% об./об., 700 мМ). DL-Дитиотреитол используется в белковых образцах для восстановления дисульфидных связей перед загрузкой образца на гель для вестерн-блота или SDS-PAGE. Он применялся в процедурах гибридизации mRNA in situ. Использовался как компонент для экстракции белков в анализе вестерн-блота, для приготовления буфера лизиса образцов для количественной масс-спектрометрии, как компонент киназного буфера для иммуноферментного анализа (ELISA).