Описание:
SMPH — гетеробифункциональный сшивающий агент, содержащий N-гидроксисукцинимидиловый (NHS) эфир и малеимидную группу. Он позволяет создавать ковалентные связи между молекулами, содержащими аминогруппы и сульфгидрильные группы. NHS-эфиры реагируют с первичными аминами при pH 7-9, образуя амидные связи, а малеимиды реагируют с сульфгидрильными группами при pH 6,5-7,5 с образованием стабильных тиоэфирных связей. В водных растворах гидролитическое разрушение NHS-эфира конкурирует с основной реакцией, причём скорость гидролиза увеличивается с ростом pH. Малеимидная группа стабильнее, но также медленно гидролизуется и теряет специфичность к сульфгидрильным группам при pH выше 7,5. Поэтому сшивание обычно проводят при pH 7,2-7,5, причём реакцию с аминами выполняют до или одновременно с реакцией с тиолами. SMPH отличается от SMPB увеличенной длиной спейсера и лучшей растворимостью в воде. Применяется в биохимии для модификации белков, создания конъюгатов антител, иммобилизации ферментов и исследований взаимодействий биомолекул. Растворы готовят непосредственно перед использованием в безводных растворителях (ДМСО, ДМФА), избегая контакта с водой.
Применение:
SMPH широко используется для создания биоконъюгатов в исследованиях и диагностике. Применяется для сшивания антител с ферментами (в иммуноферментном анализе), модификации поверхностных аминокислот белков, иммобилизации биомолекул на носителях через тиольные группы. Позволяет контролировать ориентацию молекул при конъюгации. Эффективен в проточной цитометрии, микроскопии и разработке терапевтических конъюгатов. Рабочие концентрации: 1-10 мМ в ДМСО. Хранить при -20°C в сухой атмосфере.