2-Биотинилдимедон

Описание:

2-Биотинилдимедон — реагент для обратимой биотинилизации пептидов [1]. Метка наносится на N-концевую аминогруппу пептидов, иммобилизованных на смоле, путём инкубации с избытком реагента в среде ДМФА в течение ночи. Биотинилированный пептид выделяют после кислотного расщепления трифторуксусной кислотой (ТФУ). Удаление биотиновой метки осуществляют обработкой 5% водным раствором гидразина. Реагент разработан НПО ЭкоТек для селективной модификации белков в биохимических исследованиях. Применяется в протеомике для аффинной очистки, изучения белковых взаимодействий и посттрансляционных модификаций. Физические свойства: белый или светло-жёлтый кристаллический порошок, растворим в полярных органических растворителях (ДМСО, ДМФА), умеренно стабилен в водных растворах при pH 7-8. Интересный факт: обратимое биотинилирование позволяет многократно использовать дорогостоящие аффинные носители, что снижает стоимость экспериментов. Ассоциированные протоколы и технические статьи: Очистка пептидов с использованием хемоселективных меток. Литературные ссылки: [1] B. Kellam, et al. (1997) Tetrahedron Lett., 38, 5391

Применение:

2-Биотинилдимедон применяется в биохимии для обратимой биотинильной маркировки пептидов с целью их последующей аффинной очистки на стрептавидиновых колонках. Реагент обеспечивает селективное связывание с N-концевой аминогруппой пептидов, иммобилизованных на твёрдой фазе. После отщепления от смолы и удаления защитных групп биотинилированный пептид может быть эффективно выделен с использованием авидин-биотиновой технологии. Обратимость метки позволяет элюировать целевой пептид мягкими условиями (обработка 5% гидразином), сохраняя его нативную структуру. Разработанный НПО ЭкоТек, реагент оптимизирован для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и масс-спектрометрического анализа. Основные области применения: протеомное профилирование, изучение белок-белковых взаимодействий, анализ посттрансляционных модификаций, создание диагностических тест-систем.