Fmoc-ACA-OH

Описание:

Fmoc-ACA-OH — это ключевой реагент для твердофазного синтеза пептидов (SPPS) по методу Fmoc, используемый при создании флуорогенных субстратов для протеаз на основе 7-амино-4-метилкумарина (AMC). Это производное 7-амино-4-метилкумарина-4-уксусной кислоты с защитой аминогруппы Fmoc (9-флуоренилметоксикарбонил). Реагент применяется для введения флуорогенной метки в пептидные цепи. Процесс включает: 1) закрепление Fmoc-ACA-OH на смоле Wang; 2) блокирование несвязанных гидроксильных групп ангидридом уксусной кислоты; 3) снятие Fmoc-защиты; 4) присоединение первой аминокислоты с активатором HATU (1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридин 3-оксид гексафторфосфат) и коллидином. При включении ACA в середину пептидной последовательности образуются субстраты для эндопептидаз. После отщепления от смолы трифторуксусной кислотой (TFA) полученный ACC-пептид подвергают мягкому декарбоксилированию водным основанием с образованием флуоресцентного AMC-пептида. Вещество находит применение в разработке биохимических сенсоров, исследованиях ферментативной кинетики и высокопроизводительном скрининге ингибиторов протеаз.

Применение:

Fmoc-ACA-OH применяется в твердофазном пептидном синтезе (SPPS) для создания флуорогенных субстратов протеаз. После закрепления на смоле Wang и последующей сборки пептидной цепи, включение ACA-фрагмента позволяет получать чувствительные к расщеплению эндопептидазами соединения. Образующиеся AMC-пептиды используются в ферментативных анализах благодаря интенсивной флуоресценции при гидролизе (возбуждение 380 нм, излучение 460 нм). Основные области: 1) изучение специфичности протеаз; 2) скрининг ингибиторов; 3) диагностические системы. Технические преимущества включают высокую чувствительность флуорогенного сигнала и совместимость с автоматизированными платформами.