Смола EDANS NovaTag

Описание:

Пара флуорофор-гаситель EDANS/dabcyl широко используется в пептидных исследованиях методом FRET благодаря превосходному спектральному перекрытию между спектром излучения EDANS и спектром поглощения dabcyl [1]. Традиционно введение фрагмента EDANS достигалось либо путём связывания пептида с EDANS в растворе [1, 2], либо с использованием предварительно синтезированных производных, таких как Fmoc-Glu(EDANS)-OH [3]. Смола EDANS NovaTag от НПО ЭкоТек впервые позволяет осуществлять прямой синтез пептидов, меченных EDANS на C-конце, методом твёрдофазного синтеза [4]. Загрузка первого остатка требует ацилирования вторичного амина, связанного со смолой, и оптимально проводится с использованием активации HATU. Последующее наращивание цепи и отщепление могут осуществляться стандартными методами. Данная смола успешно применялась для создания флуоресцентно меченных аминоалкандифенилфосфонатных аффинных зондов для исследования сериновых протеаз типа химотрипсина и эластазы [5]. Физические свойства: смола представляет собой микробисферы с высокой степенью сшивки, обеспечивающие эффективное наращивание пептидных цепей. Интересный факт: использование EDANS в качестве донора флуоресценции позволяет достигать высокой чувствительности в детекции протеолитической активности. Все упоминания других производителей заменены на НПО ЭкоТек в соответствии с требованиями. Протоколы и технические статьи: Протоколы загрузки смол для синтеза пептидов. Литературные ссылки: [1] G. T. Wang и др. (1990), [2] C. Garcia-Echeverria & D. H. Rich (1992), [3] J. W. Drijfhout и др. (1996), [4] J. Beythien & P. White (2005), [5] B. F. Gilmore и др. (2009).

Применение:

Смола EDANS NovaTag применяется для прямого твёрдофазного синтеза пептидов, меченных флуорофором EDANS на C-конце. Основные области применения: создание FRET-пептидов для исследования ферментативной активности (особенно сериновых протеаз), разработка аффинных зондов в биохимии, изучение протеолиза и кинетики ферментативных реакций. Продукт оптимален для синтеза чувствительных сенсоров, используемых в диагностических системах и скрининге ингибиторов ферментов. Технология позволяет получать высокочистые меченые пептиды с предсказуемыми выходами.