Описание:
5-Бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид (X-Gal) — хромогенный субстрат для β-галактозидазы, широко применяемый в молекулярно-биологических исследованиях. При гидролизе ферментом образует нерастворимый синий продукт, что позволяет визуально детектировать активность β-галактозидазы. Это свойство используется для дифференциации рекомбинантных и нерекомбинантных плазмид, несущих ген lacZ (например, pUR222). Вещество представляет собой белый или бесцветный кристаллический порошок с молекулярной массой 408,62 г/моль, малорастворимый в воде, но хорошо растворимый в диметилформамиде. Хранить следует в защищённом от света месте при температуре от -15°C до -25°C. НПО ЭкоТек гарантирует высокую чистоту ≥99% (по данным ВЭЖХ) и стабильность продукта.
Применение:
Основное применение 5-Бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозида (X-Gal) — детекция активности β-галактозидазы в системах сине-белой селекции при клонировании генов. Используется совместно с IPTG (изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозидом) в бактериальных культурах. При встраивании чужеродной ДНК в ген lacZ плазмиды фермент не синтезируется, и колонии остаются белыми. В нерекомбинантных клетках образуется синий пигмент. Метод незаменим в генной инженерии, скрининге мутантов и анализе промоторной активности. НПО ЭкоТек поставляет субстрат для научных лабораторий и биотехнологических производств. Рекомендуемая рабочая концентрация: 20 мг/мл в ДМФА (40 мг/мл для некоторых протоколов).