Описание:
Хлорид DOTAP (1,2-диолеоилокси-3-(триметиламмоний)пропан) — это катионное липидное соединение, широко используемое в молекулярной биологии для трансфекции нуклеиновых кислот в эукариотические клетки. Представляет собой белый или кремовый порошок с температурой плавления около 45°C, растворимый в хлороформе и метаноле. Обладает выраженной способностью образовывать стабильные липосомы и комплексы с ДНК/РНК за счет электростатического взаимодействия между положительно заряженной четвертичной аммониевой группой и отрицательно заряженными фосфатами нуклеиновых кислот.
Применение:
Хлорид DOTAP применяется для приготовления катионных липосом и липосомно-ДНК комплексов, а также для оценки продукции фактора некроза опухоли альфа (TNF-α). Как катионное липосомообразующее соединение, он обеспечивает эффективную трансфекцию ДНК, РНК и других отрицательно заряженных молекул в эукариотические клетки. При смешивании DOTAP с ДНК спонтанно образуются стабильные комплексы, которые можно непосредственно добавлять в культуральную среду клеток. Эти комплексы сливаются с клеточной мембраной и высвобождают ДНК в цитоплазму. Клетки трансфицируются эффективно без цитотоксических эффектов. Рекомендуется использовать примерно 5-10 мкг DOTAP на 1 мкг ДНК и 10-20 мкг DOTAP на 1 мл культуральной среды. Оптимальная рабочая концентрация и время трансфекции частично зависят от используемой клеточной линии и типа загружаемого материала (РНК, ДНК, белок). Продукт поставляется НПО ЭкоТек в виде порошка с чистотой ≥98% по данным ТСХ.