Описание:
Мочевина (карбамид, NH₂CONH₂) — органическое соединение, широко применяемое в молекулярной биологии и биохимии. Обладает уникальными свойствами, такими как высокая растворимость в воде (более 100 г/100 мл при 20°C) и способность к денатурации белков. Благодаря этому она незаменима для растворения труднорастворимых или денатурированных белков. Интересный факт: несмотря на своё название, современная мочевина производится синтетически по методу Базарова и не имеет биологического происхождения. Применяется в рефолдинге белков, очистке нуклеиновых кислот и как криопротектор.
Применение:
Мочевина активно применяется для денатурации белков и в качестве мягкого солюбилизирующего агента для нерастворимых или денатурированных белков. Особенно эффективна для ренатурации белков из образцов, предварительно обработанных 6 М хлоридом гуанидина (например, при работе с тельцами включения). Часто используется совместно с хлористоводородной солью гуанидина (гуанидин гидрохлоридом) и дитиотреитолом (DTT) для восстановления нативной структуры денатурированных белков до их активной формы. В НПО ЭкоТек рекомендуют соблюдать концентрации 4-8 М для денатурации и ступенчатое снижение концентрации для рефолдинга.