Описание:
Набор для анализа кальция Fluo-4 без отмывки предлагает гомогенный флуоресцентный метод для обнаружения внутриклеточной мобилизации ионов кальция (Ca²⁺). Клетки, экспрессирующие рецепторы GPCR, сигнализирующие через кальциевые пути, предварительно инкубируются с Fluo-4 AM, который проникает через клеточную мембрану. Внутри клетки липофильные блокирующие группы Fluo-4 AM гидролизуются неспецифическими эстеразами, образуя отрицательно заряженный флуоресцентный краситель Fluo-4, который остается в цитоплазме. Флуоресценция Fluo-4 резко усиливается при связывании с ионами кальция. При стимуляции клеток исследуемыми соединениями активация рецепторов вызывает выброс внутриклеточного кальция, что приводит к значительному увеличению флуоресценции красителя. Этот набор не требует этапа отмывки, что упрощает процедуру и минимизирует риск потери клеток. Применяется в фармакологических исследованиях, скрининге лекарств и изучении кальциевой сигнализации в различных типах клеток. Чувствительность и однородность метода обеспечивают точность измерений.
Применение:
Набор для анализа кальция Fluo-4 без отмывки используется для флуорометрического определения динамики внутриклеточного кальция в живых клетках. Основные области применения: 1) Исследование GPCR-рецепторов, связанных с кальциевой сигнализацией. 2) Скрининг лигандов и фармакологических соединений. 3) Изучение кальциевых каналов и механизмов передачи сигнала. 4) Мониторинг нейротрансмиссии и клеточной активности. Метод исключает трудоемкий этап отмывки, сохраняя жизнеспособность клеток. Совместим с HTS-системами и флуоресцентными микроскопами. Идеален для анализа первичных культур, линий клеток и 3D-моделей. Чувствительность: до 100 нМ Ca²⁺. Динамический диапазон: 0,1–10 мкМ. Набор включает оптимизированный буфер и стабильные реагенты.