Описание:
Пуромицин, также известный как стиломицин гидрохлорид, представляет собой аминонуклеозидный антибиотик и ингибитор синтеза белка. Это вещество продуцируется почвенной актинобактерией Streptomyces alboniger посредством ряда ферментативных реакций. Пуромицин эффективен как против прокариотических, так и эукариотических клеток, нарушая функцию РНК, что приводит к подавлению синтеза белка. Он также действует как ингибитор аминопептидазы и энкефалиназы. Рост бактерий, простейших, водорослей и клеток млекопитающих быстро прекращается под действием пуромицина, однако клетки, содержащие ген pac, проявляют устойчивость. Продуктом гена pac является пуромицин-N-ацетилтрансфераза, которая инактивирует пуромицин путём ацетилирования. Структурное сходство пуромицина с аминоацильным концом тРНК позволяет ему проникать в рибосому во время синтеза белка, связываться с растущей полипептидной цепью и останавливать её элонгацию. Благодаря этим свойствам, пуромицин широко применяется в клеточной культуре в качестве селективного агента для клеток, трансформированных геном устойчивости к пуромицину. Физически пуромицин дигидрохлорид представляет собой белый кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде. Интересный факт: несмотря на токсичность для клеток, пуромицин является незаменимым инструментом в генной инженерии и биотехнологических исследованиях.
Применение:
Пуромицин дигидрохлорид применяется в качестве селективного агента в клеточных культурах для отбора клеток, содержащих ген устойчивости puromycin N-acetyl-transferase (PAC). Вещество используется в исследованиях жизнеспособности гладкомышечных клеток сосудов после обработки в моделях на кроликах. В биотехнологии пуромицин применяется для получения трансгенных поросят, экспрессирующих усиленный зелёный флуоресцентный белок (EGFP), методом соматического клонирования и переноса эмбрионов. НПО ЭкоТек рекомендует использовать данный реагент строго в соответствии с протоколами исследований из-за его высокой биологической активности. Дополнительные сферы применения включают изучение механизмов трансляции, апоптоза и клеточного стресса. При работе с пуромицином необходимо соблюдать меры предосторожности, так как он является токсичным соединением.