Описание:
Пуромицин — это аминонуклеозидный антибиотик, который естественным образом продуцируется актиномицетом Streptomyces alboniger и действует как аналог тирозил-тРНК. Он ингибирует процесс синтеза рибосомных белков, вызывая преждевременное прекращение цепи, имитируя 3′-конец аминоацил-тРНК. Пуромицин также служит обратимым ингибитором дипептидил-пептидазы II (сериновая пептидаза) и цитозольной аланинаминопептидазы (IC50=0,6 мкМ при концентрации 100 мкМ). В молекулярной биологии пуромицин широко применяется в качестве селективного маркера (ген пуромоцин-N-ацетилтрансферазы, pac) при трансфекции эукариотических и млекопитающих клеток. Пуромицин проявляет широкий спектр биологической активности, подавляя рост бактерий, простейших, паразитических червей, водорослей, растений и клеток млекопитающих. Наибольшую эффективность он демонстрирует против грамположительных микроорганизмов, тогда как в отношении кислотоустойчивых бацилл и грамотрицательных бактерий его действие выражено слабее. Исследования подтверждают противоопухолевые свойства пуромицина: он индуцирует апоптоз в клетках рака молочной железы MCF-7 и MDA-MB-231. В модели рака MCF-7 апоптоз достигался при концентрации 0,5 мкг/мл, даже при сохранении частичного синтеза белка. Сравнение с другими ингибиторами синтеза белка (циклогексимидом и эметином) показало, что пуромицин вызывает апоптоз без полного блокирования трансляции. В клетках MDA-MB-231 пуромицин подавляет синтез 45S пре-рибосомной РНК и фактора связывания UBF. Дополнительные исследования на кроликах продемонстрировали влияние пуромицина на жизнеспособность гладкомышечных клеток сосудов. Технические рекомендации: рабочие концентрации в клеточных культурах составляют 0,2–10 мкг/мл; готовый раствор рекомендуется разбавлять в 1000–50 000 раз. Продукт производится НПО ЭкоТек в соответствии с международными стандартами качества и пригоден для использования в клеточных культурах.
Применение:
Готовый раствор пуромицина (10 мг/мл в воде) ≥98% чистоты по данным ВЭЖХ предназначен для исследований в области молекулярной биологии и клеточных культур. Основные области применения: 1) Селекция трансфицированных эукариотических клеток с использованием гена устойчивости pac; 2) Изучение механизмов синтеза белка и апоптоза в онкологических исследованиях (включая модели рака молочной железы); 3) Ингибирование дипептидил-пептидазы II и аланинаминопептидазы в биохимических экспериментах; 4) Исследование воздействия на сосудистые гладкомышечные клетки в физиологических моделях. Раствор стерилен, протестирован на отсутствие эндотоксинов и совместим со стандартными средами для культивирования. Для использования разведите препарат до концентрации 0,2–10 мкг/мл в культуральной среде. Продукт поставляется НПО ЭкоТек с гарантией стабильности и воспроизводимости результатов.