Термолизин из Geobacillus stearothermophilus

Описание:

Термолизин — это термостабильная металлоэндопептидаза, выделяемая из бактерий Geobacillus stearothermophilus. Фермент обладает уникальной специфичностью, отличной от других протеаз, и широко используется для исследований последовательностей белков. Оптимальная активность проявляется при pH 8.0 и температуре 70°C, стабилен в диапазоне pH 5–9.5. Термолизин гидролизует пептидные связи на N-концевой стороне гидрофобных аминокислотных остатков, предпочтительно после лейцина, фенилаланина, изолейцина, валина, метионина и аланина. Фермент содержит четыре иона кальция и кофакторы цинк и кальций. Низкая специфичность расщепления позволяет получать короткие фрагменты, подходящие для секвенирования. Также используется для коммерческого синтеза предшественника аспартама.

Применение:

Неспецифический анализ активности протеазы. Термостабильная внеклеточная металлоэндопептидаза, содержащая четыре иона кальция. Кофакторы: цинк и кальций. Гидролизует белковые связи на N-концевой стороне гидрофобных аминокислотных остатков. Оптимум pH 8.0, оптимальная температура 70°C. Стабилен от pH 5 до 9.5. Предпочтительное расщепление: X-расщепление-Y-Z, где X=любая аминокислота; Y=Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala; Z=любая аминокислота, кроме Pro. Часто используется для ограниченного протеолиза в картировании пептидов и изучении структуры и конформационных изменений белков. Показано, что термолизин имеет про-последовательность, действующую как внутримолекулярный шаперон in vivo. Также применялся для изучения влияния хлорида натрия на термическую стабильность и каталитическую активность. Широко используется для коммерческого синтеза N-(бензилоксикарбонил)-L-аспартил-L-фенилаланинметилового эфира, предшественника аспартама.