Описание:
Бензоназа® Нуклеаза — генетически модифицированная эндонуклеаза, полученная из бактерии Serratia marcescens. Фермент расщепляет все формы ДНК и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые), не проявляя протеолитической активности. Эффективен в широком диапазоне условий и обладает исключительно высокой удельной активностью. Фермент полностью переваривает нуклеиновые кислоты до олигонуклеотидов длиной 2-5 оснований, оканчивающихся 5′-монофосфатом (ниже предела гибридизации), что идеально для удаления нуклеиновых кислот из рекомбинантных белков и обеспечения соответствия требованиям FDA по содержанию нуклеиновых кислот. Способность Бензоназы быстро гидролизовать нуклеиновые кислоты делает её отличным выбором для снижения вязкости, сокращения времени обработки и увеличения выхода белка. Например, фермент совместим с реагентами для экстракции белка BugBuster® и PopCulture®, поэтому может добавляться вместе с ними для устранения вязкости и удаления нуклеиновых кислот из экстрактов E. coli. Фермент состоит из двух субъединиц по 30 кДа каждая. Активен в диапазоне pH 6-10 и температур 0-42°C, требует 1-2 мМ ионов магния (Mg²⁺) для активации. Сохраняет активность в присутствии ионных и неионных детергентов, восстановителей, ФМСФ (1 мМ), ЭДТА (1 мМ) и мочевины (относительная активность зависит от конкретных условий). Активность ингибируется при концентрациях > 150 мМ одновалентных катионов, > 100 мМ фосфатов, > 100 мМ сульфата аммония или > 100 мМ HCl гуанидина. Бензоназа Нуклеаза доступна в ультрачистой (>99% по SDS-PAGE) и чистой (>90%) формах со стандартной концентрацией 25-29 Ед/мкл и высокой концентрацией (HC) 250 Ед/мкл. Оба препарата не содержат детектируемых протеаз и имеют удельную активность >1×10⁶ Ед/мг белка. Препарат чистоты >99% тестируется на эндотоксины и содержит <0,25 ЕЭ/1000 единиц. Продукт поставляется в виде 0,2 мкм профильтрованного раствора в 50% глицерина. Хранить при -20°C. Общий уровень эндотоксинов: 90% по SDS-PAGE.
Применение:
Используется для удаления нуклеиновых кислот из белковых образцов. Применяется в биотехнологии при очистке рекомбинантных белков, снижении вязкости лизатов клеток, подготовке образцов для хроматографии и электрофореза. Незаменим для соблюдения нормативов по остаточному содержанию ДНК/РНК в фармацевтических препаратах.