Описание:
Бензоназа® Нуклеаза — генетически модифицированная эндонуклеаза, полученная из Serratia marcescens. Фермент расщепляет все формы ДНК и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые), не проявляя протеолитической активности. Обладает широким диапазоном рабочих условий и исключительно высокой удельной активностью. Полностью переваривает нуклеиновые кислоты до олигонуклеотидов длиной 2-5 оснований, заканчивающихся 5′-монофосфатом (ниже предела гибридизации), что идеально для удаления нуклеиновых кислот из рекомбинантных белков в соответствии с требованиями FDA к допустимому уровню контаминации. Способность Бензоназы быстро гидролизовать нуклеиновые кислоты делает её оптимальным выбором для снижения вязкости, сокращения времени обработки и увеличения выхода белка. Например, фермент совместим с реагентами для экстракции белка BugBuster и PopCulture, что позволяет добавлять его одновременно с этими реагентами для устранения вязкости и удаления нуклеиновых кислот из экстрактов E. coli. Молекула фермента состоит из двух субъединиц по 30 кДа каждая. Активен в диапазоне pH 6–10 и температур 0–42°C, требует 1–2 мМ ионов магния (Mg²⁺) для активации. Сохраняет активность в присутствии ионных и неионных детергентов, восстановителей, PMSF (1 мМ), ЭДТА (1 мМ) и мочевины (относительная активность зависит от конкретных условий). Активность ингибируется при концентрациях >150 мМ одновалентных катионов, >100 мМ фосфата, >100 мМ сульфата аммония или >100 мМ солянокислого гуанидина. Бензоназа Нуклеаза доступна в ультрачистом (>99% по данным SDS-PAGE) и чистом (>90%) сортах со стандартной концентрацией 25–29 ед./мкл и высококонцентрированная форма (HC) — 250 ед./мкл. Оба препарата не содержат детектируемой протеазной активности и имеют удельную активность >1×10⁶ ед./мг белка. Препарат чистотой >99% тестируется на эндотоксины и содержит <0,25 EU/1000 единиц. Продукт поставляется в 50% глицерина. Хранение при -20°C. Общий уровень эндотоксинов: 90% по данным SDS-PAGE.
Применение:
Применяется для удаления нуклеиновых кислот из образцов белка. Идеально подходит для очистки рекомбинантных белков от контаминации нуклеиновыми кислотами, снижения вязкости растворов в биотехнологических процессах, увеличения выхода целевых продуктов и обеспечения соответствия требованиям FDA. Широко используется в производстве терапевтических белков, вакцин и в молекулярно-биологических исследованиях.