Описание:
Трипсин — это протеолитический фермент, широко применяемый в клеточной биологии для снятия адгезивных клеток с поверхности культуральных сосудов. Раствор содержит трипсин свиного происхождения и ЭДТА (этилендиаминтетрауксусную кислоту) в виде тетранатриевой соли (ЭДТА·4Na), растворённые в сбалансированном солевом растворе Хенкса с феноловым красным. Концентрация трипсина, необходимая для эффективного отслоения клеток, варьируется в зависимости от типа клеток и возраста культуры. Продукт подвергается стерильной фильтрации и соответствует стандартам BioReagent, что гарантирует его безопасность для использования в клеточных культурах. Трипсин расщепляет пептидные связи между карбоксильными группами аргинина и лизина, обеспечивая быстрое и щадящее отделение клеток без повреждения мембран. Раствор окрашен феноловым красным для визуального контроля pH среды.
Применение:
Раствор Трипсина с ЭДТА производства НПО ЭкоТек предназначен для пассирования клеточных культур. Основное применение — удаление адгезивных клеток (фибробластов, эпителиальных клеток и др.) с поверхности культуральных флаконов или планшетов. Стандартный протокол применения: удаление культуральной среды, промывка стерильным фосфатно-солевым буфером (PBS), внесение трипсинового раствора и инкубация при 37°C в течение 3-5 минут. После отслоения клеток рекомендуется добавление ингибитора трипсина (например, сыворотки или ингибитора на основе сои) для остановки реакции. Продукт особенно эффективен для первичных культур и чувствительных клеточных линий благодаря оптимизированной концентрации ЭДТА (0,2 г/л), которая хелатирует ионы кальция и магния, ослабляя межклеточные связи. Раствор поставляется в 5-кратной концентрации для удобства хранения и разведения перед использованием.