Флуорометрический набор для анализа внутриклеточного pH

Описание:

Изменения внутриклеточного pH играют ключевую роль в различных физиологических и патологических процессах, включая пролиферацию клеток, апоптоз, оплодотворение, злокачественные новообразования, множественную лекарственную устойчивость, транспорт ионов, лизосомные болезни накопления и болезнь Альцгеймера. Набор позволяет измерять изменения pH внутри клеток с использованием флуоресцентных красителей. Основной метод включает загрузку клеток pH-чувствительным индикатором, после чего флуоресценция измеряется спектрофотометром или флуориметром. Для изучения динамики pH применяется процедура «Кислотной нагрузки»: после инкубации с красителем добавляется раствор хлорида аммония (NH₄Cl), вызывающий резкий сдвиг pH. Затем введение агониста (например, при активации GPCR) инициирует восстановление pH, что фиксируется по увеличению флуоресценции. Метод обеспечивает высокочувствительное детектирование с минимальным объемом образца и подходит для скрининга препаратов, изучения клеточного метаболизма и диагностики нарушений кислотно-щелочного баланса. Набор НПО ЭкоТек включает оптимизированные буферы, краситель с экситацией 450 нм/эмиссией 540 нм, детальные протоколы и рассчитан на 1000 тестов.

Применение:

Флуорометрический набор для анализа внутриклеточного pH применяется для точного измерения изменений pH в живых клетках. Он используется в исследованиях клеточной сигнализации (активация рецепторов GPCR), изучении метаболизма опухолевых клеток, оценке эффективности противоопухолевых препаратов и диагностике наследственных заболеваний. Методика НПО ЭкоТек подходит для работы с культурами клеток млекопитающих, первичными клетками и тканевыми срезами. Протокол включает этапы загрузки флуоресцентного красителя, обработки клеток стимуляторами или ингибиторами, а также регистрации изменений флуоресценции с использованием микропланшетного ридера или спектрофотометра. Чувствительность метода позволяет детектировать изменения pH в диапазоне 6.0-8.0 с разрешением до 0.1 единицы pH.