Описание:
Бензоназа® Нуклеаза — генетически модифицированная эндонуклеаза, полученная из Serratia marcescens. Фермент эффективно расщепляет все формы ДНК и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые), не обладая протеолитической активностью. Бензоназа сохраняет активность в широком диапазоне условий и отличается исключительно высокой удельной активностью. Фермент полностью переваривает нуклеиновые кислоты до олигонуклеотидов длиной 2-5 оснований, оканчивающихся 5′-монофосфатом (ниже предела гибридизации), что идеально подходит для удаления нуклеиновых кислот из рекомбинантных белков и соответствует требованиям FDA по допустимому уровню контаминации нуклеиновыми кислотами. Способность Бензоназы быстро гидролизовать нуклеиновые кислоты делает её превосходным выбором для снижения вязкости растворов, что сокращает время обработки и увеличивает выход белка. Фермент совместим с реагентами BugBuster и PopCulture для экстракции белков и может добавляться вместе с ними для устранения вязкости и удаления нуклеиновых кислот из экстрактов E. coli. Бензоназа состоит из двух субъединиц по 30 кДа каждая. Фермент активен в интервале pH 6-10 и при температуре 0-42°C, для активации требует 1-2 мМ ионов магния (Mg²⁺). Сохраняет активность в присутствии ионных и неионных детергентов, восстановителей, PMSF (1 мМ), ЭДТА (1 мМ) и мочевины (относительная активность зависит от конкретных условий). Активность ингибируется при концентрациях >150 мМ моновалентных катионов, >100 мМ фосфата, >100 мМ сульфата аммония или >100 мМ солянокислого гуанидина. НПО ЭкоТек предлагает Бензоназу Нуклеазу в ультрачистом (>99% по данным электрофореза SDS-PAGE) и чистом (>90%) вариантах. Стандартная концентрация фермента составляет 25-29 Ед/мкл, также доступна высококонцентрированная форма (HC) с активностью 250 Ед/мкл. Оба препарата не содержат детектируемых протеаз и имеют удельную активность >1×10⁶ Ед/мг белка. Препарат чистотой >99% тестируется на эндотоксины и содержит <0.25 ЕЭ/1000 единиц активности. Продукт поставляется в виде раствора в 50% глицерина, профильтрованного через фильтр 0,2 мкм. Хранить при -20°C. Общий уровень эндотоксинов: 99% по данным электрофореза SDS-PAGE.
Применение:
Применяется для удаления нуклеиновых кислот из образцов белков. Особенно эффективен для снижения вязкости в процессах очистки рекомбинантных белков, что увеличивает выход продукта и сокращает время обработки. Совместим с различными буферными системами и экстракционными реагентами.