Описание:
Флуорогенный пептид из 11 аминокислот с внутренним гашением флуоресценции, выступающий чувствительным и селективным субстратом для катепсинов D и E (kcat/Km = 15.6 µM⁻¹s⁻¹ для катепсина D крысиного желудка и 10.9 µM⁻¹s⁻¹ для катепсина E эритроцитов человека). Не является субстратом для катепсинов B, H или L. Расщепление происходит по пептидной связи Phe-Phe, что приводит к усилению флуоресценции. Применяется для скрининга ингибиторов катепсинов D и E, а также для определения активности этих ферментов в тканевых экстрактах и лизатах клеток. Максимум возбуждения: ~328 нм, максимум испускания: ~393 нм. Уникальные свойства пептида обусловлены его структурой, включающей флуоресцентный донор и акцептор, разделённые последовательностью аминокислот. При целостности пептида флуоресценция гасится, а после расщепления — высвобождается, обеспечивая точное измерение ферментативной активности. Данный субстрат позволяет проводить высокочувствительные исследования в биохимии и молекулярной биологии, особенно при изучении протеолитических процессов.
Применение:
Флуорогенный субстрат для катепсинов D и E производства НПО ЭкоТек широко применяется в научных исследованиях для измерения активности катепсинов D и E в биологических образцах. Основные области использования: 1) Скрининг потенциальных ингибиторов ферментов для разработки новых лекарственных препаратов; 2) Анализ протеолитической активности в тканях и клеточных лизатах; 3) Исследование роли катепсинов в патологических процессах (онкология, нейродегенеративные заболевания); 4) Контроль качества при очистке ферментов. Методика основана на регистрации увеличения флуоресценции при расщеплении пептидной связи между остатками фенилаланина. Чувствительность метода позволяет детектировать активность ферментов в широком динамическом диапазоне. Субстрат стабилен при хранении и прост в использовании, что делает его незаменимым инструментом для лабораторий, изучающих протеазы.