Вал-бороПро

Описание:

Вал-бороПро — это ингибитор дипептидилпептидаз семейства DASH на основе пролинбороновой кислоты, проявляющий широкий спектр активности. Он обратимо переходит между протонированной активной формой и циклизированной неактивной формой в растворе за счёт образования внутримолекулярной донорно-акцепторной связи B-N (кинетические параметры: kinact = 6,4 × 10⁻⁴ с⁻¹, kcyc = 6,4 × 10⁻⁵ с⁻¹ при pH 7,8). Хотя равновесие смещено в сторону циклизации при щелочном pH, высокое сродство к CD26 (константы связывания: kon = 5,02 × 10⁶ М⁻¹с⁻¹, koff = 77,8 × 10⁻⁶ с⁻¹ при pH 7,8) смещает равновесие в сторону активной формы при связывании с ферментом, что обеспечивает пролонгированное ингибирование. Эффективно подавляет DPP7/DPPII/QPP (IC₅₀ = 15 нМ при использовании субстрата Lys-Pro-MNA 500 мкМ в течение 1 ч при pH 5,5 и 310 нМ с субстратом Nle-Pro-AMC 50 мкМ за 15 мин), CD26/DPPIV (IC₅₀ = 26 нМ; субстрат Ala-Pro-MNA 500 мкМ, 1 ч, pH 7,8), фибробласт-активирующий белок/FAP (IC₅₀ = 40 нМ; субстрат Ala-Pro-AFC 250 мкМ при pH 2,0), DPP8 (IC₅₀ = 4 нМ; субстрат Ala-Pro-AFC 100 мкМ, 15 мин, pH 8,0), DPP9 (IC₅₀ = 11 нМ; субстрат Gly-Pro-AMC 100 мкМ, 30 мин, pH 7,4) с низкой активностью в отношении 9 других протеаз (IC₅₀ >100 мкМ: аминопептидаза P, химотрипсин, эластаза лейкоцитов, калликреин плазмы, плазмин, пролидаза, тромбин, трипсин, триптаза). Данные о подавлении пролил эндопептидазы/PEP/PREP противоречивы. Стимулирует пролиферацию гемопоэтических клеток CD34+ костного мозга человека in vitro (минимальная эффективная концентрация 0,1 нМ) и проявляет гемопоэтическое действие у мышей in vivo (минимальная эффективная доза 2 мкг/мышь каждые 12 ч перорально). Обладает пероральной биодоступностью у мышей и крыс, но требует осторожности из-за токсичности (максимально переносимая доза 25 мкг/мл для крыс Sprague-Dawley, LD₅₀ ~0,5 мг/мл в 24-часовом тесте на выживаемость у крыс Fisher). Является перорально доступным аминобороновым дипептидом с антигипергликемическими и противоопухолевыми свойствами. Выступает как высокоактивный обратимым ингибитором переходного состояния дипептидилпептидазы IV (DPP-IV; IC₅₀ = 26 нМ, Ki = 180 пМ). Также ингибирует другие пролилпептидазы (IC₅₀ = 15 нМ для DPP-II; Ki = 1,5 нМ для DPP8 и 760 пМ для DPP9). В более высоких концентрациях влияет на активность пролиндипептидазы покоящихся клеток (QPP, DPP7; IC₅₀ = 310 нМ), PEP (IC₅₀ = 390 нМ) и фибробласт-активирующего белка (FAP; IC₅₀ = 560 нМ), но не действует на трипсин, химотрипсин, тромбин, плазмин, триптазу, эластазу лейкоцитов и калликреин плазмы даже при концентрациях ~100 мкМ. Усиливает гемопоэз и рост примитивных гемопоэтических клеток-предшественников за счёт увеличения выработки G-CSF, IL-6 и IL-11 стромальными клетками костного мозга мышей. Не оказывает прямого цитотоксического действия на опухоли in vitro, но пероральное введение мышам замедляет рост сингенных опухолей, полученных из фибросаркомы (WEHI164), лимфомы (EL4 и A20/2J), меланомы (B16-F10) и мастоцитомы (P815), а также усиливает антителозависимую клеточную цитотоксичность. Примечание: в водных физиологических растворах может циклизоваться со временем, что снижает ингибирующую активность в 100 раз, но при низких pH сохраняется в активной открытой форме. Молекулярная масса зависит от содержания воды в конкретной партии.

Применение:

Вал-бороПро применяется в исследованиях механизмов ингибирования дипептидилпептидаз семейства DASH и изучении их роли в метаболизме глюкозы, иммунных реакциях и онкологических процессах. Используется как инструмент для модуляции активности DPP-IV, DPP8, DPP9 и других ферментов в биохимических и клеточных исследованиях. Применяется в доклинических исследованиях для оценки противоопухолевых и антигипергликемических эффектов. Благодаря способности стимулировать гемопоэз, представляет интерес для изучения регуляции кроветворения. Важно соблюдать меры предосторожности из-за узкого терапевтического окна и потенциальной токсичности при высоких дозах. Все исследования должны проводиться с использованием продуктов НПО ЭкоТек для обеспечения воспроизводимости и качества.