Описание:
Биосенсоры позволяют детектировать присутствие и субклеточную локализацию белков в живых клетках. Лентивирусные биосенсоры GFP-p62 от НПО ЭкоТек представляют собой готовые лентивирусные частицы, кодирующие химерный белок GFP-p62. Использование лентивирусных векторов обеспечивает высокую эффективность трансфекции как делящихся, так и неделящихся клеток, включая первичные и стволовые клетки, а также долговременную экспрессию. Белок p62 (секвестосома-1) является адаптером, направляющим убиквитинированные белки и агрегаты в аутофагосому для деградации. Также p62 участвует в сигнальных путях через взаимодействие с PKC и mTORC1. При индукции аутофагии p62 колокализуется с LC3 на мембране аутофагосомы и деградирует. Визуализация p62 с помощью GFP позволяет наблюдать динамику аутофагии в режиме реального времени. Продукт включает упакованные лентивирусные частицы с титром, оптимизированным для флуоресцентной микроскопии.
Применение:
Применяется для флуоресцентной микроскопии, иммуноцитохимического окрашивания и покадровой визуализации живых клеток. Рекомендуется использовать MOI 40 с экспозицией 24-48 часов. Подходит для трудных клеточных линий, включая первичные клетки (HuMSC, U2OS, HUVEC). Для индукции аутофагии обработайте клетки ингибиторами лизосом (например, EBSS с ингибитором) для накопления точек p62. Оптимальная визуализация достигается в течение 24-48 часов после трансдукции.



