Щелочная фосфатаза (AP)

Описание:

Щелочная фосфатаза (AP) – фермент, катализирующий гидролиз фосфомоноэфиров с образованием неорганического фосфата и соответствующего спирта. Оптимум активности достигается при pH 8–10. В качестве субстрата используется 4-нитрофенилфосфат; буфер – диэтаноламин (активность 400 ед./мг при 25 °C с глициновым буфером). Фермент гидролизует 5′-монофосфатные группы ДНК и РНК, а также 5′-ди- и трифосфатные группы РНК. Применяется для дефосфорилирования нуклеиновых кислот, в том числе для предотвращения лигирования плазмидных векторов. Также используется в иммуноферментном анализе (ELISA) в составе конъюгатов. Фермент выделен из слизистой оболочки кишечника телят.

Применение:

Щелочная фосфатаза используется в молекулярной биологии для селективного удаления концевых фосфатных групп из олигонуклеотидов, а также в реакциях нуклеотидного обмена белков. Применяется для дефосфорилирования ДНК перед лигированием, для снижения фонового сигнала при клонировании. В аналитической биохимии – для различения фосфорилированных гликанов и аминокислотных остатков. Также широко используется в иммуноферментном анализе (ELISA) и вестерн-блоттинге. Продукт производства НПО ЭкоТек.