BCIP (5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат п-толуидиновая соль)

Описание:

BCIP (5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат) в форме п-толуидиновой соли является хромогенным субстратом для щелочной фосфатазы. При гидролизе ферментом образуется нерастворимый в воде продукт синего/фиолетового цвета, который легко визуализируется. Субстрат широко используется в гистохимии и иммунохимии для обнаружения антител, меченных щелочной фосфатазой. Продукт реакции стабилен и не растворяется в воде, что обеспечивает четкое окрашивание. BCIP обычно применяют в комбинации с NBT (нитросиний тетразолий) для усиления сигнала. П-толуидиновая соль растворима в диметилформамиде (ДМФ), что позволяет готовить концентрированные сток-растворы. Чистота продукта ≥99% (определена методом ВЭЖХ). Хранить при -20°C в защищенном от света месте.

Применение:

Для колориметрического обнаружения молекул, меченных щелочной фосфатазой, используют систему BCIP/NBT. BCIP (п-толуидиновая соль) растворяют в ДМФ до концентрации 50 мг/мл и хранят при -20°C. Рабочий раствор готовят смешиванием BCIP и NBT в соответствующем буфере (например, 100 мМ Трис-HCl, 100 мМ NaCl, 50 мМ MgCl2, pH 9.5). Эта система подходит для различных методов: Саузерн- и Нозерн-блоттинга, Вестерн-блоттинга, гибридизации in situ и иммуногистохимии. При инкубации с щелочной фосфатазой образуется нерастворимый диформазановый продукт пурпурного цвета, который легко визуализируется. Для удобства также доступны готовые таблетки или жидкие растворы BCIP/NBT. Продукт поставляется в виде порошка с чистотой 99% (ВЭЖХ). CAS номер: 6578-06-9.