Описание:
Аденозин-5′-трифосфат, иммобилизованный на агарозе 4B (5′-АТФ-агароза 4B) представляет собой аффинный сорбент, предназначенный для использования в аффинной хроматографии. Продукт поставляется в виде лиофилизированного порошка, содержащего лактозный стабилизатор, который необходимо удалить перед применением путем промывки геля на фильтре водой или буфером. Иммобилизация АТФ на агарозе обеспечивает специфическое связывание ферментов и белков, обладающих сродством к АТФ. Матрица агарозы 4B обладает высокой пористостью и гидрофильностью, что минимизирует неспецифическое взаимодействие и позволяет проводить эффективную очистку. Перед использованием рекомендуется провести регенерацию геля согласно стандартным протоколам.
Применение:
5′-АТФ-агароза 4B предназначена для аффинной хроматографии ферментов, связывающих АТФ, таких как киназы, АТФ-зависимые лигазы и другие нуклеотид-связывающие белки. Продукт может быть использован для очистки, изучения кинетических свойств и определения констант связывания. Также возможна очистка рекомбинантных белков, меченных АТФ-связывающими доменами. Для достижения наилучших результатов рекомендуется подбор условий элюции (например, градиент АТФ или имидазола) с учетом специфичности каждого целевого белка. Данный сорбент совместим с различными буферными системами, включая трис-фосфатные и хелатные буферы. При использовании в колоночной хроматографии объем геля подбирают в зависимости от количества целевого белка. После использования колонку промывают и хранят при 2–8 °C в присутствии консерванта (например, 0,02% азида натрия).



