Набор для детекции Duolink flowPLA (красный флуорофор)

Описание:

Набор для детекции Duolink flowPLA (красный) предназначен для выявления белков, белковых взаимодействий и посттрансляционных модификаций на уровне отдельных молекул в фиксированных клетках с помощью проточной цитометрии. Технология основана на методе проксимити-лигирования (PLA), позволяющем детектировать эндогенные события с высокой чувствительностью. В состав набора входят все необходимые реагенты для амплификации и детекции связанных PLA-проб: реакционный буфер, полимераза, флуоресцентно меченые олигонуклеотиды и другие компоненты. Набор доступен в пяти вариантах с разными флуорофорами: фиолетовый, красный, зелёный, оранжевый и дальний красный. Для проведения эксперимента требуется суспензия фиксированных клеток, два первичных антитела (мышиные или кроличьи, IgG-класса), соответствующие PLA-пробы (PLUS и MINUS), промывочный буфер и проточный цитометр. Перед использованием рекомендуется оптимизировать условия фиксации, блокировки и титрования антител в стандартных ИФА, ИГХ или ИЦХ. Набор сопровождается подробным протоколом, который доступен на сайте НПО ЭкоТек. Продукт не содержит первичных антител и PLA-проб — их необходимо приобретать отдельно.

Применение:

Набор Duolink flowPLA (красный) применяется в проточной цитометрии для количественного анализа белок-белковых взаимодействий, посттрансляционных модификаций (например, фосфорилирования, ацетилирования) и уровня экспрессии белков в гетерогенных клеточных популяциях. Метод позволяет детектировать события на единичных молекулах, что обеспечивает высокую чувствительность и специфичность. Используется в исследованиях клеточной сигнализации, механизмов заболеваний, иммунологии и разработке лекарственных препаратов. Для работы необходимы первичные антитела, PLA-пробы и проточный цитометр с соответствующим лазером и детектором для красного флуорофора (например, Cy5 или Alexa Fluor 647). Рекомендуется следовать протоколу Duolink PLA для проточной цитометрии от НПО ЭкоТек.