Описание:
Щелочная фосфатаза из слизистой оболочки кишечника крупного рогатого скота представляет собой димерный, мембраносвязанный гликопротеин. Существует по меньшей мере три изоформы, которые обычно содержат два N-связанных и один или более O-связанных гликана на мономер. Фермент требует ионов цинка, а также двухвалентных ионов магния или кальция для активности. Молекулярная масса составляет около 140 кДа (димер). Оптимум pH находится в щелочной области (pH 9-10). Фермент стабилен при лиофилизации и хранении в сухом виде. Широко используется в биохимии и молекулярной биологии для дефосфорилирования белков и нуклеиновых кислот. Также применяется для конъюгации с антителами в иммуноферментном анализе (ELISA) и вестерн-блоттинге. Высокая удельная активность (≥10 DEA единиц/мг твердого вещества) делает его подходящим для чувствительных методов детекции.
Применение:
Щелочная фосфатаза используется для дефосфорилирования казеина и других белков, а также 5′-концов ДНК или РНК для предотвращения самолигирования. После дефосфорилирования нуклеиновые кислоты могут быть помечены радиоактивным фосфатом с помощью Т4 полинуклеотидкиназы. Фермент применяется для конъюгации с антителами и другими белками в методах ELISA, вестерн-блоттинга и гистохимического обнаружения. Рекомендуется для мечения белков при высокой чувствительности. Продукт от НПО ЭкоТек имеет высокую удельную активность, оптимальную для конъюгации антител и белков.



