Описание:
Линия клеток CHO/dhFr-AC-free (каталожный номер 05011002) представляет собой производную линию клеток CHO/dhFr- (каталожный номер НПО ЭкоТек 94060607), адаптированную для роста в среде CHO DHFR (НПО ЭкоТек C8862) без компонентов животного происхождения. Клетки растут в суспензии в виде агрегатов. Исходная линия CHO/dhFr- не экспрессирует фермент дигидрофолатредуктазу (DHFR), необходимый для синтеза пуринов, поэтому для роста требует присутствия гипоксантина (или аденина), глицина и тимидина. Однако адаптированные клетки могут расти без добавления гипоксантина и тимидина, получая их из среды. Среда α-MEM без рибонуклеозидов и дезоксирибонуклеозидов не поддерживает рост CHO/dhFr- или её бессывороточной адаптации, так как они не содержат гена DHFR. Для поддержания культуры рекомендуется использовать среду CHO DHR (НПО ЭкоТек C8862) с добавлением 2 мМ глутамина, 100 мкМ гипоксантина, 16 мкМ тимидина (например, HT-добавка НПО ЭкоТек H0137) и 0,4 мкМ аминоптерина (НПО ЭкоТек A5159). При замораживании используют среду для замораживания, состоящую из свежей и кондиционированной среды в соотношении 50:50 с добавлением 10% ДМСО. Рекомендуется поддерживать плотность клеток примерно 3–9×10^5 клеток/мл, при 5% CO2 и 37°C. Жизнеспособность клеток после размораживания может быть низкой и первоначально снижаться; полное восстановление может занять до 2 недель.
Применение:
Линия клеток CHO/dhFr-AC-free предназначена для исследовательских целей, включая изучение экспрессии рекомбинантных белков, поскольку дефицит DHFR позволяет использовать селективные маркеры. Также может применяться для исследований в области клеточной биологии и разработки биопрепаратов.







