Описание:
Линия клеток 293 (HEK-293) получена из эмбриональной почки человека и имеет эпителиальную морфологию. Клетки трансформированы сдвинутыми фрагментами ДНК аденовируса человека типа 5 (Ad5). Линия чувствительна к аденовирусам человека и их ДНК, что позволяет использовать её для титрования аденовирусов и выделения мутантов с дефектом трансформации. Клетки являются гипотриплоидными, с модальным числом хромосом 64 (в 30% клеток). Интеграция Ad-вставки (нуклеотиды 1–4344) происходит в хромосому 19 (19q13.2). Клетки экспрессируют необычный поверхностный рецептор для витронектина, состоящий из интегриновых субъединиц β-1 и α-v. При работе с клетками следует учитывать, что они легко отслаиваются при комнатной температуре и могут требовать до 7 дней для повторного прикрепления после размораживания. Для культивирования рекомендуется среда EMEM (EBSS) с 2 мМ глутамина, 1% заменимых аминокислот (NEAA) и 10% FCS. Пассирование проводят при 70–80% конфлюэнтности с использованием 0,25% трипсина или трипсин/ЭДТА, пересев 1:2–1:6, при 37°C и 5% CO2. Замораживание клеток проводят в среде с 5% DMSO и 95% FCS. Доступны форматы: клетки (1 флакон), ДНК (5 мкг), РНК (5 мкг) и кДНК (20 мкл).
Применение:
Линия клеток 293 применяется для изучения эффектов инсектицидных токсинов Bt (Cry1Ab и Cry1Ac) отдельно или в сочетании с гербицидом на основе глифосата (PMID 22337346), для токсикологических исследований этоксилированных адъювантов гербицидов на основе глифосата (PMID 23000283), для стабильной экспрессии 11-β-гидроксистероиддегидрогеназы типов 1 и 2 после трансфекции соответствующей кДНК (PMID 12844344), а также в качестве хозяина для трансфекции кДНК TLR4 (HEK-TLR4) с целью экспрессии TLR4 и индукции активности промотора IL-8 в ответ на нейтрофильную эластазу (PMID 12782302).







