Клеточная линия Psi-CRIP, мышиная NIH 3T3

Описание:

Клеточная линия Psi-CRIP получена из мышиных фибробластов NIH 3T3 путем последовательной трансформации двумя мутантными провирусными геномами вируса мышиного лейкоза Молони, несущими комплементарные мутации в областях gag-pol и env. Каждый геном содержит делецию последовательности Psi, необходимой для эффективной упаковки ретровирусного генома в вирусные частицы, а также дополнительные изменения на 3'-конце провируса. Линия позволяет получать клоны, стабильно продуцирующие рекомбинантные ретровирусы с амфотропным спектром хозяев. Вирусные продуценты, полученные на основе Psi-CRIP, не передают упаковочную функцию и не образуют хелперный вирус. Для культивирования рекомендуется среда DMEM с 2 мМ глутамина и 10% эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота (FBS); по данным депозитора, также возможно использование 10% телячьей сыворотки (CS). Пассирование проводят при 70-80% конфлюэнтности, рассевая клетки в соотношении 1:3–1:6 (2–4 × 10^4 клеток/см²) с использованием 0,25% трипсина или трипсина/ЭДТА; культивируют при 37°C и 5–10% CO₂. Доступны форматы: клетки (1 флакон, код -1VL) и ДНК (5 мкг, код -DNA-5UG).

Применение:

Линия предназначена для упаковки рекомбинантных ретровирусов без хелперного вируса с амфотропным спектром хозяев. Может использоваться для получения стабильных клонов-продуцентов с высоким титром вируса.