Клеточная линия Ampli-GPE (клон A57), мышиные эмбриональные фибробласты NIH Swiss

Описание:

Клеточная линия Ampli-GPE (клон A57) представляет собой мышиные эмбриональные фибробласты NIH Swiss, полученные из клеток NIH3T3 (каталожный номер 93061524) путем котрансфекции двумя рекомбинантными химерными провирусными генами в векторе BMG Neo. Для снижения гомологии между провирусной ДНК в упаковывающей клетке и ретровирусным вектором гены gag-pol и env вируса мышиного лейкоза Молони были разделены на две разные плазмиды, в которых 5'-длинный концевой повтор (LTR) и 3'-LTR были заменены промотором мышиного металлотионеина I или геном β-глобина кролика. Эта система экспрессии и амплификации обеспечивает высокий титр вируса, достаточный для переноса генов в соматические клетки, и позволяет избежать образования репликационно-компетентных вирусов. Клетки культивируют в среде DMEM с 2 мМ глутамина, 250 мкг/мл G418 и 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) при 37°C и 5% CO2. Для субкультивирования используют 0,25% трипсин или трипсин/ЭДТА, рассев 1:2–1:6 при 70–80% конфлюэнтности. Доступны варианты: клеточная линия (1 флакон) или ДНК (5 мкг).

Применение:

Клеточная линия Ampli-GPE применяется для упаковки ретровирусов и в анализах переноса генов.