X1/5, клеточная линия HeLa, человеческая шейка матки, эпителиальная

Описание:

Клеточная линия X1/5 получена на основе клеток HeLa (аденокарцинома шейки матки человека) и стабильно трансфицирована конструкцией, кодирующей тетрациклин-контролируемый трансактиватор (tTA) — химерный белок, состоящий из тетрациклинового репрессора и активирующего домена белка VP16 вируса простого герпеса. tTA стимулирует транскрипцию с минимального промотора, происходящего из промотора IE цитомегаловируса человека, в сочетании с тетрациклиновыми операторными последовательностями. Интеграция гена люциферазы под контролем tTA-зависимого промотора в эту клеточную линию приводит к высокому уровню тетрациклин-чувствительной экспрессии люциферазы. Активность люциферазы может регулироваться в диапазоне до пяти порядков величины в зависимости от концентрации тетрациклина в культуральной среде (0–1 мкг/мл). Клетки культивируют в среде EMEM (EBSS) с добавлением 2 мМ глутамина, 1% заменимых аминокислот, 1% витаминов, 500 мкг/мл G418, 300 мкг/мл гигромицина и 10% эмбриональной телячьей сыворотки. Для замораживания используют 40% среды, 10% DMSO и 50% эмбриональной телячьей сыворотки. При субкультивировании клетки рассевают в соотношении 1:5–1:20 (5×10³–2×10⁴ клеток/см²) с использованием 0,25% трипсина или трипсин/ЭДТА. Доступны варианты: клеточная линия (95051229-1VL) или ДНК (95051229-DNA-5UG).

Применение:

Клеточная линия X1/5 позволяет проводить специфический и строгий контроль активности отдельного гена (люциферазы) в клетках млекопитающих. Она также подходит для создания систем типа «включено/выключено» и анализа скорости деградации мРНК в физиологических условиях.