Протеиназа K из Tritirachium album, лиофилизированный порошок, ≥3.0 ед/мг

Описание:

Протеиназа K из Tritirachium album (синоним: эндопептидаза K) представляет собой лиофилизированный порошок с активностью ≥3.0 ед/мг. Фермент проявляет высокую активность в отношении нативных белков, обладает широкой специфичностью и расщепляет многие белки даже в нативном состоянии. Преимущественно гидролизует пептидные связи, прилегающие к карбоксильной группе алифатических и ароматических аминокислот с блокированными α-аминогруппами. Оптимум pH составляет 7.5–9.0, изоэлектрическая точка — 8.9. Для активации требуется Ca2+ (1–5 мМ). Ингибируется диизопропилфторфосфатом (DFIP) и фенилметилсульфонилфторидом (PMSF). Фермент стабилен в широком диапазоне pH, концентраций солей, детергентов (SDS) и температур. В присутствии 0.1–0.5% SDS протеиназа K сохраняет активность и расщепляет различные белки и нуклеазы в препаратах ДНК, не нарушая целостность выделенной ДНК. Одна единица гидролизует денатурированный мочевиной гемоглобин с образованием цвета, эквивалентного 1.0 мкмоль тирозина в минуту при pH 7.5 и 37 °C (определение по реактиву Фолина–Чокальтеу).

Применение:

Протеиназа K используется для протеолитической инактивации нуклеаз при выделении ДНК и РНК. Применяется для удаления эндотоксинов, связанных с катионными белками, такими как лизоцим и рибонуклеаза A. Полезна для выделения митохондрий из печени, дрожжей и маша, определения локализации ферментов на мембранах, обработки срезов парафинизированных тканей для выявления антигенных сайтов и переваривания белков из образцов мозговой ткани.