Рекомбинантный мышиный интерферон-гамма (IFN-γ), экспрессированный в E. coli

Описание:

Интерферон-гамма (IFN-γ) — регуляторный белок, продуцируемый активированными NK-клетками и T-клетками (CD4+TCRα/β+, CD8+TCRα/β+ и TCRγ/δ+). Биологическая активность IFN-γ включает специфическое связывание с единственным классом рецепторов высокой аффинности. Кроме того, IFN-γ усиливает ряд функций лимфоидных клеток, включая антимикробные и противоопухолевые ответы макрофагов, NK-клеток и нейтрофилов. Рекомбинантный мышиный IFN-γ представляет собой белок длиной 134 аминокислоты с предсказанной молекулярной массой 15,6 кДа. C-концевое укорочение вследствие протеолитического расщепления происходит во время ферментации в E. coli и приводит к образованию белка массой 15,1 кДа, что подтверждено масс-спектрометрией. SDS-PAGE анализ рекомбинантного мышиного IFN-γ показывает полосу, мигрирующую примерно на 11–12 кДа в невосстанавливающих и восстанавливающих условиях. Продукт экспрессирован в E. coli. Физическая форма: стерильно фильтрованный, лиофилизированный из 10 мМ фосфата натрия, pH 7,0 + 25 мМ NaCl. Лиофилизированный белок стабилен в течение нескольких недель при комнатной температуре, но лучше хранить при -20 °C. После быстрого центрифугирования восстановить в фосфате натрия, pH 8,0, до концентрации 1 мг/мл. Дальнейшие разведения следует делать в RPMI + 10% FCS или 5% HAS и хранить при 2–8 °C в течение одной недели или при -20 °C для последующего использования.

Применение:

Для большинства применений in vitro IFN-γ проявляет биологическую активность в диапазоне концентраций 0,1–10,0 нг/мл. ED50, определенная в анализе ингибирования цитопатического эффекта на клетках мыши NIH 3T3, зараженных VSV, составляет ≤ 0,1 нг/мл.