C17.2 — иммортализованная линия нейральных клеток-предшественников мыши

Описание:

Линия C17.2 представляет собой иммортализованную линию нейральных клеток-предшественников мыши, способную к дифференцировке in vitro. Линия была получена путём ретровирусной трансдукции avian myc онкогена в митотические клетки-предшественники мозжечка новорождённых мышей. Использованный ретровирусный вектор MMLV содержал ген неомицинфосфотрансферазы (neo), обеспечивающий устойчивость клеток к неомицину. Морфология клеток может изменяться со временем: при низкой плотности посева клетки склонны к образованию отростков, при высокой — становятся плоскими и без отростков. Линия получена от мышей линии CD1 x C57BL/6. Для культивирования рекомендуется среда DMEM с 2 мМ глутамина и 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), флаконы предварительно покрывать поли-L-лизином (10 мкг/мл в стерильной дистиллированной воде). Клетки пассируют раз в неделю, заменяя 50% среды на кондиционированную, или расщепляют в соотношении 1:10–1:20 с использованием трипсина/ЭДТА. Условия культивирования: 5% CO2, 37 °C. При расщеплении субконфлюентных культур 1:10–1:20 плотность посева составляет 2–4 x 10^4 клеток/см². Возможно расщепление до 1:50, но при этом фенотип может измениться (клетки становятся плоскими, эпителиоподобными и обычно не окрашиваются на нейрофиламенты или GFAP).

Применение:

Линия C17.2 является ценным инструментом для исследований in vitro и in vivo, направленных на понимание контроля клеточной судьбы и дифференцировки нейральных клеток-предшественников.