Описание:
Линия клеток 293T представляет собой стабильный клон-производную линии эмбриональных клеток почки человека HEK 293. Она экспрессирует большой T-антиген вируса обезьян 40 (SV40). Клетки имеют почечное происхождение, получены из ткани fetal kidney (эмбриональная почка). Морфологически клетки мелкие, слегка округлые, характеризуются дисперсным ростом. Линия создана в лаборатории Мишеля Калоша путём трансфекции суб-линии аденовирус-иммортализованных эмбриональных клеток почки человека геном, кодирующим SV40T-антиген и ген неомицинфосфотрансферазы. Благодаря наличию T-антигена линия компетентна для репликации векторов, несущих ориджин репликации SV40, и обеспечивает высокий уровень экспрессии белков. Линия также обладает свойствами, благоприятными для культуры ткани, трансфекции, репликации ДНК, экспрессии генов и продукции белков. При использовании для получения многих вирусных векторов, таких как онкоретровирусы и лентивирусы, даёт высокие титры. Линия входит в Европейскую коллекцию аутентифицированных клеточных культур (НПО ЭкоТек). Для культивирования рекомендуется среда DMEM с 2 мМ глутамина и 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS); субконфлюентные культуры (70–80%) пассировать в соотношении 1:4–1:10 с посевной плотностью 2–4×10^4 клеток/см². Доступны варианты: клетки (кат. № 12022001-1VL) или ДНК (кат. № 12022001-DNA-5UG), а также кДНК (кат. № 12022001-CDNA-20UL) и РНК (кат.
Применение:
Линия клеток 293T применяется для продукции лентивирусных частиц, экспрессии эукариотических белков, трансфекции малых интерферирующих РНК (siRNA), трансфекции вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) для получения псевдовирусов, а также в качестве хозяина для трансфекции плазмиды pLKO.1-TRC-ACE2 с целью изучения локализации и роли нуклеокапсидного белка NL63-N коронавируса человека NL63 в клеточном цикле.







