Коллаген I типа, раствор из хвоста крысы

Описание:

Коллаген I типа — белок внеклеточного матрикса, имеющий тройную спиральную структуру. В гомотримерной форме коллаген I типа состоит из трех идентичных α-цепей, одна из которых имеет незначительные вариации последовательности. Впервые коллаген I типа был выделен из сухожилия хвоста крысы; он содержит две основные α-цепи (α1 и α2) и одну β-цепь. Раствор коллагена I типа из хвоста крысы (каталожный номер C3867) поставляется в виде стерильного водного раствора в 20 мМ уксусной кислоте с концентрацией белка, указанной на флаконе (примерно 100 мг белка на флакон). Концентрацию белка определяли биуретовым методом. Электрофорез в SDS-полиакриламидном геле показывает типичную картину полос для коллагена I типа: дублет с кажущейся молекулярной массой 115 и 130 кДа и еще один дублет при 215 и 235 кДа. На основании этого анализа чистота образца коллагена составляет >95%. Продукт стерильно отфильтрован для минимизации риска загрязнения. При хранении в холодильнике (2–8 °C) раствор может загелироваться; это нормально, поскольку продукт поставляется в виде кислого раствора (20 мМ уксусной кислоты) и разжижается при осторожном нагревании. Важно: после разведения до рабочей концентрации в нейтральном или близком к нейтральному водном растворе коллаген I типа быстро гелеобразуется при комнатной температуре (~20–25 °C).

Применение:

Коллаген I типа используется в качестве покрытия для поддержки роста и дифференцировки адгезивных клеток. Раствор коллагена I типа из хвоста крысы применяли для покрытия культуральных планшетов и чашек для клеточной линии гепатоцитов человека HepG2 и подоцитов. Также он использовался в качестве стандарта для построения калибровочной кривой общего содержания коллагена при количественном определении пре-геля внеклеточного матрикса печени.