Коллагеназа из Clostridium histolyticum, тип IV, для выделения гепатоцитов крысы

Описание:

Коллагеназа из Clostridium histolyticum (синоним: Clostridiopeptidase A), тип IV, CAS 9001-12-1. Активность: 0.5–5.0 FALGPA единиц/мг твердого вещества, ≥125 CDU/мг твердого вещества. Продукт подходит для выделения физиологически активных гепатоцитов крысы. Фермент также содержит клострипаин, нейтральную протеазу и триптическую активность. Растворы обычно готовят в концентрации 1–2 мг/мл в TESCA-буфере (50 мМ TES, 0.36 мМ хлорид кальция, pH 7.4 при 37 °C). Одна единица коллагенолитической активности (CDU) высвобождает пептиды из коллагена ахиллова сухожилия быка, эквивалентные 1.0 мкмоль лейцина по нингидриновой реакции, за 5 часов при pH 7.4 и 37 °C в присутствии ионов кальция. Одна единица гидролиза FALGPA гидролизует 1.0 мкмоль фурилакрилоил-Leu-Gly-Pro-Ala в минуту при 25 °C. Одна единица нейтральной протеазы гидролизует казеин с образованием окраски, эквивалентной 1.0 мкмоль тирозина за 5 часов при pH 7.5 и 37 °C. Одна единица клострипаина гидролизует 1.0 мкмоль BAEE в минуту при pH 7.6 и 25 °C в присутствии DTT. Продукт стабилен в течение 6 лет при -20 °C; не теряет активности в течение 30 дней при 37 °C, 50 °C и -20 °C. Растворы сырой коллагеназы стабильны при быстром замораживании аликвот (10 мг/мл) и хранении при -20 °C; повторные циклы замораживания-оттаивания повреждают раствор. Продукт сохраняет 100% активности в течение 7 часов при хранении на льду.

Применение:

Коллагеназа из Clostridium histolyticum применяется для ферментативного разрушения соединительнотканных компонентов тканей с целью получения отдельных клеток. Используется для переваривания опухолевых тканей, экстирпированной мезентериальной жировой ткани, сегментов толстой кишки, эндометрия, декапсулированных семенников, а также для перфузии печени и почек, переваривания поджелудочной железы и выделения непаренхиматозных гепатоцитов. Продукт тестирован на пригодность для выделения гепатоцитов крысы при концентрации около 1 мг/мл в общем объеме 100 мл на каждую печень крысы. Подходит для получения суспензии отдельных клеток для секвенирования.