Коллагеназа из Clostridium histolyticum, порошок, для клеточных культур

Описание:

Коллагеназа из Clostridium histolyticum (CAS 9001-12-1) представляет собой порошок, который подходит для переваривания и выделения физиологически активных клеток островков поджелудочной железы, а также для культур клеток. Фермент содержит коллаген-связывающий домен (CBD) и домены, подобные поликистозной болезни почек (PKD-подобные), а также участок связывания Ca2+, который важен для его функциональности. Препарат получен из коллагеназы типа XI (C7657) и содержит также клострипаин, неспецифическую нейтральную протеазу и триптическую активность. Растворы обычно готовят в концентрации 1–2 мг/мл в TESCA-буфере (50 мМ TES, 0,36 мМ хлорида кальция, pH 7,4 при 37 °C). Одна единица коллагенолитической активности (CDU) высвобождает пептиды из коллагена ахиллова сухожилия быка, эквивалентные 1,0 мкмоль лейцина по нингидриновой реакции, за 5 часов при pH 7,4 и 37 °C в присутствии ионов кальция. Одна единица гидролиза FALGPA гидролизует 1,0 мкмоль фурилакрилоил-лейцил-глицил-пролил-аланина в минуту при 25 °C. Одна единица нейтральной протеазы гидролизует казеин с образованием окраски, эквивалентной 1,0 мкмоль тирозина, за 5 часов при pH 7,5 и 37 °C. Одна единица клострипаина гидролизует 1,0 мкмоль BAEE в минуту при pH 7,6 и 25 °C в присутствии DTT. В поставленном виде продукт стабилен в течение одного года при -20 °C.

Применение:

Продукт подходит для дезагрегации тканей: опухолей человека, почек мыши, мозга взрослого человека и плода, легких и многих других эпителиальных тканей. Эффективен в исследованиях перфузии печени и почек, переваривании поджелудочной железы, выделении непаренхиматозных клеток печени крысы и приготовлении гепатоцитов. Также использовался при подготовке артериальной ткани для изучения конечных продуктов гликирования. Фермент протестирован на высвобождение гепатоцитов в концентрации примерно 1 мг/мл; концентрации для переваривания составляют от 0,1 до 5 мг/мл. Применялся для переваривания образцов поджелудочной железы для выделения островков, легочной артерии для выделения гладкомышечных клеток легочных сосудов (PVSMCs) и хряща для выделения хондроцитов.