Коллагеназа из Clostridium histolyticum, лиофилизированный порошок, для клеточных культур

Описание:

Коллагеназа — протеаза, расщепляющая коллаген, белок тройной спирали. Различают три типа тканевых коллагеназ, относящихся к семейству матриксных металлопротеиназ (MMP). Коллагеназа, полученная из Clostridium histolyticum, обладает очень высокой активностью, расщепляя коллаген с обоих концов при температурах до 4–10 °C. Сырые смеси коллагеназы содержат два основных типа ферментов: коллагеназу и клострипаин. Продукт представляет собой смесь ферментов, секретируемых C. histolyticum, различающихся относительным соотношением 10–18 компонентов. Основными компонентами являются две коллагеназы, клострипаин и нейтральная протеаза. Синергетическое действие этих ферментов разрушает коллаген и другие внутриклеточные материалы. Для эффективного высвобождения клеток из ткани необходимо действие как коллагеназ, так и нейтральной протеазы. Различные типы коллагена являются естественными субстратами для коллагеназы. Фермент активируется четырьмя грамм-атомами кальция на моль фермента и ингибируется этиленгликоль-бис(бета-аминоэтиловым эфиром)-N,N,N',N'-тетрауксусной кислотой, бета-меркаптоэтанолом, глутатионом, тиогликолевой кислотой и 8-гидроксихинолином. Лиофилизированный порошок, полученный из раствора, профильтрованного через 0,2 мкм, подходит для культивирования клеток.

Применение:

Коллагеназа из Clostridium histolyticum используется для выделения клеток Сертоли, сравнения ферментативных методов, подготовки тканей для иммуноцитохимии, экстракции сперматозоидов из яичек, получения суспензий отдельных клеток и иммунофлуоресценции. Продукт подходит для дезагрегации опухолей человека, почек мыши, тканей мозга взрослого человека и плода, легких и многих других эпителиальных тканей. Эффективен в исследованиях перфузии печени и почек, при переваривании поджелудочной железы и получении гепатоцитов. Также использовался при подготовке артериальной ткани для изучения конечных продуктов гликирования. Фермент протестирован на высвобождение гепатоцитов в концентрации примерно 1 мг/мл. Концентрации для переваривания составляют от 0,1 до 5 мг/мл.