LentiBrite гистон H2B-RFP лентивирусный биосенсор

Описание:

Биосенсоры LentiBrite представляют собой готовые лентивирусные частицы, кодирующие важные белки, участвующие в аутофагии, апоптозе и клеточной структуре, для визуализации в живых клетках и in vitro. Лентивирусная трансдукция обеспечивает более высокую эффективность по сравнению с химическими методами трансфекции, позволяет трансдуцировать делящиеся и неделящиеся клетки, включая первичные клетки и стволовые клетки, и обеспечивает длительную стабильную экспрессию трансгена. Лентивирусные частицы LentiBrite Histone H2B-RFP кодируют гистон H2B, слитый с красным флуоресцентным белком RFP, что обеспечивает яркую флуоресценцию и точную локализацию для анализа динамики хромосом в трудно-трансфицируемых типах клеток. Продукт поставляется в виде одного флакона, содержащего 25 мкл лентивирусных частиц с минимальным титром 3 x 10^8 инфекционных единиц (IFU) на мл. Промотор: EF-1 (фактор элонгации-1). Рекомендуемые значения MOI для высокой эффективности трансдукции и интенсивности сигнала находятся в диапазоне 20–40, но могут варьироваться в зависимости от типа клеток. Лентивирус стабилен в течение как минимум 4 месяцев при хранении при -80 °C; после первого размораживания следует немедленно поместить на лед и заморозить аликвоты. Повторные циклы замораживания-оттаивания могут снизить титр вируса и эффективность трансдукции.

Применение:

Биосенсор применяется для флуоресцентной микроскопии живых клеток с целью изучения динамики хромосом в различных типах клеток, включая трудно-трансфицируемые, такие как первичные HUVEC, HT1080, мезенхимальные стволовые клетки человека (HuMSC) и U2OS. Позволяет наблюдать митоз на разных стадиях, включая метафазу, телофазу и анафазу, а также выявлять дефекты сегрегации хромосом. Рекомендуется анализировать уровень экспрессии в течение 24–48 часов после трансдукции для оптимальной визуализации; инфицированные клетки можно замораживать для сохранения флуоресцентной экспрессии.