LentiBrite RFP-LC3 лентивирусный биосенсор

Описание:

LentiBrite RFP-LC3 лентивирусный биосенсор представляет собой готовые лентивирусные частицы, кодирующие белок LC3, слитый с красным флуоресцентным белком TagRFP. Биосенсоры позволяют обнаруживать присутствие или отсутствие конкретного белка, а также его субклеточную локализацию в живых клетках. Лентивирусная трансдукция обеспечивает высокую эффективность трансфекции делящихся и неделящихся клеток, длительную стабильную экспрессию трансгена и низкую иммуногенность. Частицы имеют промотор EF-1 (фактор элонгации-1). Один флакон содержит 25 мкл лентивирусных частиц с минимальным титром 3 x 10^8 инфекционных единиц (IFU) на мл. Рекомендуемые значения MOI (множественности инфекции) обычно находятся в диапазоне 20–40, но могут варьироваться в зависимости от типа клеток. Для оптимальной визуализации рекомендуется анализировать уровень экспрессии в течение 24–48 часов после трансдукции, так как интенсивность флуоресценции может со временем снижаться.

Применение:

Биосенсор предназначен для флуоресцентной микроскопии и конфокальной микроскопии для мониторинга образования аутофагосом в живых клетках. Он был протестирован на клетках HT1080, HeLa, HUVEC и мезенхимальных стволовых клетках человека (HuMSC) при MOI 20–40. Ингибитор аутофагии 3-метиладенин (3-MA) полностью блокирует образование RFP-LC3-положительных puncta, что подтверждает специфичность сигнала.