Трипсин из поджелудочной железы свиньи, раствор, BioReagent, для клеточных культур

Описание:

Раствор трипсина из поджелудочной железы свиньи, стерильно фильтрованный, BioReagent, подходит для клеточных культур. Содержит 25 г трипсина на литр в сбалансированном солевом растворе Хенкса с феноловым красным. Трипсин расщепляет пептиды по C-концевой стороне остатков лизина и аргинина. Скорость гидролиза снижается, если по соседству с сайтом расщепления находится кислый остаток, и прекращается, если пролин находится на карбоксильной стороне сайта. Оптимальный pH для активности трипсина — 7–9. Трипсин также может расщеплять сложноэфирные и амидные связи синтетических производных аминокислот. В раствор трипсина добавляют ЭДТА в качестве хелатирующего агента, который нейтрализует ионы кальция и магния, маскирующие пептидные связи, на которые действует трипсин; удаление этих ионов повышает ферментативную активность. Ингибиторы сериновых протеаз, включая DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF и апротинин, подавляют трипсин. Одна единица BAEE вызывает изменение A253 на 0,001 в минуту при pH 7,6 и 25 °C с использованием BAEE в качестве субстрата. Продукт следует хранить замороженным при -20 °C.

Применение:

Трипсин применяется для снятия адгезивных клеток с поверхности культурального сосуда. Концентрация трипсина, необходимая для отделения клеток от субстрата, зависит в первую очередь от типа клеток и возраста культуры. Трипсины также используются для ресуспендирования клеток при культивировании, в протеомике для расщепления белков и в различных гель-расщеплениях. Дополнительные применения включают оценку кристаллизации мембранными методами и исследование, показывающее, что скорость и выход укладки белков могут быть ограничены наличием кинетических ловушек.