Описание:
Millicoat® Cell Adhesion Strips представляют собой 12 съемных стрипов по 8 лунок в рамке 96-луночного планшета, что обеспечивает удобство и гибкость при постановке экспериментов. Лунки рядов A–G покрыты человеческим витронектином, а ряд H каждого стрипа покрыт BSA и служит отрицательным контролем. Клетки высевают на покрытую подложку, затем адгезировавшие клетки фиксируют и окрашивают. Относительную адгезию определяют по показателям абсорбции. Стрипы можно хранить при 2–8 °C в фольгированном пакете не менее 3 месяцев; неиспользованные стрипы можно помещать обратно в пакет, обеспечив наличие осушителя и плотное закрытие пакета.
Применение:
Методика предназначена для оценки клеточной адгезии на покрытом витронектином субстрате. Рекомендуется регидратировать стрипы фосфатно-солевым буфером (PBS) в течение 15 минут, затем вносить суспензию клеток (обычно 1×10^5–1×10^7 клеток/мл) и инкубировать 45 минут при 37 °C в CO2-инкубаторе. После отмывки клетки окрашивают 0,2% кристаллическим фиолетовым в 10% этаноле, затем добавляют солюбилизационный буфер (смесь 0,1 М NaH2PO4, pH 4,5 и 50% этанола) и измеряют абсорбцию при 540–570 нм.




