Трипсин-ЭДТА раствор 0,25%, стерильно фильтрованный, BioReagent, для культур клеток

Описание:

Раствор трипсина и ЭДТА (0,25%) для культур клеток, стерильно фильтрованный, BioReagent. Состав: 2,5 г трипсина (из поджелудочной железы свиньи) и 0,2 г ЭДТА·4Na на литр сбалансированного солевого раствора Хенкса с феноловым красным. Трипсин представляет собой одноцепочечный полипептид из 223 аминокислотных остатков, образующийся при удалении N-концевого гексапептида из трипсиногена; последовательность сшита шестью дисульфидными мостиками. Это нативная форма трипсина (β-трипсин), которая может автолизироваться с образованием α-трипсина. Трипсин относится к семейству сериновых протеаз. ЭДТА добавляют в качестве хелатирующего агента, нейтрализующего ионы кальция и магния, которые экранируют пептидные связи, что повышает ферментативную активность. Продукт хранится замороженным при температуре от -10 до -40 °C; следует избегать повторных циклов замораживания-оттаивания. Раствор содержит феноловый красный; при транспортировке на сухом льду возможно подкисление раствора (оранжевый цвет), что не влияет на пригодность, pH можно скорректировать гидроксидом натрия. Для разведения или растворения трипсина следует использовать забуференный солевой раствор без Ca2+ и Mg2+.

Применение:

Раствор трипсин-ЭДТА применяют для отделения адгезивных клеток от поверхности культурального пластика, в том числе для получения суспензии одиночных клеток для проточной цитометрии и секвенирования. Использовался для диссоциации клеток карциномы толстой кишки HT29, клеток линии tcA-201 и фибробластов мыши L929. Концентрация трипсина, необходимая для отделения клеток, зависит от типа клеток и возраста культуры.