Описание:
Wnt-5a — представитель высококонсервативного семейства белков Wnt, состоит из 352 аминокислот, содержит 23 консервативных цистеина и цистеин, модифицированный пальмитатом, который необходим для связывания с рецептором и биологической активности. В аминокислотной последовательности Wnt-5a также присутствует N-концевой сигнальный пептид, что обеспечивает секрецию белка в культуральную среду при экспрессии в клетках. Wnt-5a очищен из кондиционированной среды с использованием хроматографии на Blue-Sepharose, гель-фильтрации и аффинной хроматографии на гепарине. Wnt-5a относится к неканоническому классу Wnt-белков, которые не зависят от β-катенина или ингибируют его сигнализацию. Wnt-сигнализация вовлечена в контроль дифференцировки стволовых клеток. Wnt5a, кратковременный фактор, секретируемый стволовыми клетками, критичен для коррекции сердечных дефектов при инъекции эмбриональных стволовых клеток в сердце. Форма поставки: замороженная жидкость в PBS, содержащем 1.0% Chaps. Упаковка: 8-10 мкг/флакон.
Применение:
Биологическая активность Wnt-5a продемонстрирована по способности антагонизировать индукцию синтеза щелочной фосфатазы Wnt-3a в присутствии BMP4 в остеобластных клетках C2C12; EC50 для этого эффекта обычно составляет 100 нг/мл. При работе с белком следует учитывать его высокую адгезивность: он прилипает к пластиковой посуде в отсутствие детергента Chaps. Рекомендуется дозировать белок непосредственно на клетки в требуемом разведении без предварительной фильтрации. Токсичность Chaps в буфере для хранения следует проверять эмпирически на клеточной линии перед использованием Wnt-5a. При длительном воздействии на клетки (дни/недели) среду, содержащую Wnt-5a, рекомендуется заменять ежедневно, чтобы избежать накопления Chaps.





