Описание:
4X SDS буфер для образцов представляет собой концентрированный буферный раствор, стандартно используемый для денатурации белков перед электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (ДСН-ПААГ). Состав включает дитиотрейтол (DTT) для полного восстановления дисульфидных связей и бромфеноловый синий для визуализации фронта электрофореза. Типичный состав: 200 мМ Tris-HCl (pH 6,8), 8% ДСН, 40% глицерин, 400 мМ DTT, 0,4% бромфеноловый синий. Буфер может использоваться в концентрации 2X для большинства применений. Обеспечивает эффективную денатурацию и придание отрицательного заряда белкам за счет связывания с ДСН, что позволяет разделять их по молекулярной массе. Рекомендуется для подготовки образцов для вестерн-блоттинга, иммунопреципитации и других методов анализа белков. Буфер стабилен при хранении при -20°C. Перед использованием разморозить и тщательно перемешать. Производитель: НПО ЭкоТек.
Применение:
4X SDS буфер для образцов применяется для денатурации белковых лизатов для вестерн-блоттинга. Также используется для кипячения иммунопреципитированных комплексов перед вестерн-блоттингом. Буфер подходит для всех типов белковых образцов, включая клеточные лизаты, тканевые экстракты и рекомбинантные белки. В классическом протоколе образец смешивают с буфером в соотношении 3:1 (образец:буфер) и кипятят 5 минут при 95-100°C. После центрифугирования супернатант наносят на гель. Буфер обеспечивает полную денатурацию и предотвращает агрегацию белков, что критично для корректного определения молекулярной массы. Рекомендуется использовать свежеприготовленный буфер для оптимальных результатов.



