Лизаргиназа (LysargiNase)

Описание:

Лизаргиназа — это металлопротеиназа, обнаруженная у термофильной археи Methanosarcina acetivorans. Она специфически расщепляет белки перед остатками лизина и аргинина. Это расщепление приводит к образованию пептидов с молекулярными массами, подобными триптическим пептидам, но с N-концевыми остатками лизина или аргинина, которые могут быть фрагментированы с образованием спектров, доминирующих по b-ионам. Это улучшает идентификацию C-концевых пептидов белка и сайтов фосфорилирования, богатых аргинином. В отличие от трипсина, лизаргиназа расщепляет также метилированные лизин и аргинин, что позволяет обнаруживать эпигенетические модификации. Лизаргиназа является уникальной альтернативой трипсину для анализа посттрансляционных модификаций. Фермент стабилен в широком диапазоне pH и температур, что делает его удобным для различных протоколов протеомики. Рекомендуется для использования в белковом гидролизе, фосфопротеомике и анализе эпигенетических модификаций. Подходит для гидролиза в растворе или в геле.

Применение:

Лизаргиназа подходит для гидролиза пептидов или белков в растворе или в геле. Она активна в различных условиях растворителя, включая 5 мМ TCEP, 5% метанол, 5% ацетонитрил, 0,8 М мочевину, 0,1% RapiGest, 1% дезоксихолат, 0,2% SDS и 1% NP-40. Активна до 55°C при pH 6–9. Лизаргиназа обратимо ингибируется 1,10-фенантролином, ЭДТА и другими хелаторами кальция и цинка. Для гидролиза пептидов или белков рекомендуется соотношение фермент:субстрат от 1:100 до 1:20 (вес/вес).