Щелочная фосфатаза

Описание:

Щелочная фосфатаза из слизистой оболочки кишечника крупного рогатого скота представляет собой фосфомоноэстеразу и пирофосфатазу. Это димерный мембранный гликопротеин. Существует как минимум три изоформы, каждая из которых содержит два N-связанных и один или более O-связанных гликана на мономер. Для активности фермента требуются ионы цинка, а также магния или кальция. Оптимум pH составляет около 9–10. Фермент стабилен в глицериновом растворе. Щелочная фосфатаза широко используется в биохимии и молекулярной биологии для дефосфорилирования белков и нуклеиновых кислот, а также в иммуноферментном анализе (ELISA) и конъюгации антител.

Применение:

Щелочная фосфатаза (ЩФ) используется для дефосфорилирования казеина и других белков, а также 5′-концевых фосфатных групп ДНК и РНК для предотвращения лигирования. После дефосфорилирования можно провести мечение радиоактивным фосфатом с помощью полинуклеотидкиназы T4. ЩФ также применяется для конъюгации с антителами и белками в иммунохимических методах. Высокая удельная активность рекомендуется для конъюгации антител. Щелочная фосфатаза из бычьей слизистой кишечника использовалась в исследованиях гидролиза полифторированных алкилфосфатов и для изучения функциональных изменений изоформ ЩФ при созревании тканей. Фермент поставляется в виде буферного водно-глицеринового раствора (BioUltra) с активностью ≥5,700 DEA ед./мг белка.